Люциферази – це білки з ферментативною активністю, які в присутності АТФ, кисню та відповідного субстрату (зазвичай
), каталізують окислення субстрату в реакції, яка призводить до випромінювання фотона.
Зазвичай використовуваним репортерним геном є ген люциферази світлячка Photinus pyralis. Цей ген кодує 61-кДа фермент, який окислює D-люциферин у присутності АТФ, кисню та Mg(++), утворюючи флуоресцентний продукт, який можна кількісно визначити шляхом вимірювання вивільненого світла..
Люциферини – це клас низькомолекулярних субстратів, які реагують з киснем у присутності люциферази (ферменту) для вивільняють енергію у вигляді світла.
Застосування люциферази Аналіз репортерного гена є одним із найвідоміших застосувань люциферази. Вони включають клонування регуляторної області цікавого гена перед геном люциферази та введення отриманого вектора експресії в клітини.
Ген люциферази Renilla зазвичай використовується як внутрішній контроль в аналізах репортерного гена на основі люциферази нормалізувати значення експериментального репортерного гена для варіацій, які можуть бути спричинені ефективністю трансфекції та обробкою зразків.
Люцифераза є фермент, який використовується для біолюмінесценції різними організмами в природі, найбільш відомий світлячок. Вчений виробляє конструкцію, в якій регуляторна область гена-мішені злита з послідовністю ДНК, що кодує люциферазу (рис. 15.24).