На даний момент основним методом синтезу circRNA in vitro є лігування кінців лінійного попередника РНК для отримання ковалентно замкнутого кола.30 листопада 2021 р
Утворюється цирРНК подією зворотного з’єднання. Сплайсинг, опосередкований сплайсосомами, об’єднує 5′-сайт сплайсингу (донор сплайсингу) нижнього екзона з 3′-сайтом сплайсингу (сплайс-акцептор) верхнього екзона, утворюючи кільцеву РНК із з’єднанням «змішаного екзону» між екзоном 4 та екзоном 2 .
CircRNA можуть бути створені in vitro з лінійних попередників за допомогою реакцій, що каталізуються хімічними речовинами або ферментами48. Як правило, синтез РНК з використанням хімічних речовин призводить до виробництва коротких олігомерів (~50–70 нт). Тому для синтезу більших молекул необхідний додатковий етап лігування кількох РНК.
Показано, що вакцини CircRNA є більш стабільними, безпечними, простими у виробництві та масштабному виробництві порівняно з вакцинами мРНК.. Однак ці вакцини також страждають від кількох недоліків, таких як низька ефективність циркуляції для довшого попередника РНК та використання ліпідних наночастинок (LNP) у їх доставці.
circRNA може змінювати злоякісний фенотип ракових клітин, пригнічуючи репресивні ефекти мікроРНК на наступні гени. Через вісь дії circRNA-miRNA-ген circRNAs можуть регулювати розвиток захворювання та перешкоджати фізіологічним і біохімічним функціям.
Вони можуть включати екзонні або інтронні послідовності своїх батьківських генів, а їхні розміри можуть варіюватися від менше 100 нт до більше 4000 нт [5]. CircRNA можуть походити з екзонів, інтронів, антисмислових, міжгенних областей і 5' або 3' нетрансльованих областей [6].